歡迎訪問青島碩遠硅膠科技有限公司網站!

全國咨詢熱線

400-6052-977

薄層層析硅膠

資訊動態

聯系我們

青島碩遠硅膠科技有限公司

業務經理:15265203977

                 QQ:3064385339

業務一部  座機:0532-87810877

                手機: 15192622177

                QQ:2101077641

業務二部  座機:0532-87810977

                手機: 15192683977

                QQ:1252403083

售后電話:15192685877    

技術電話:18366268899

服務監督電話:15192661599 

座機:0532-87819577

傳真:0532-87810277 

郵箱: shuoyuanchina@163.com

網址:www.cubeworksinc.com

阿里網址一:shuoyuanchina.1688.com

阿里網址二:chinashuoyuan.1688.com

公司地址:山東省青島市城陽區上馬街道岙東中路438號


柱層析硅膠的操作方法及注意事項是什么

您當前的位置 : 首 頁 > 資訊動態 > 技術支持

柱層析硅膠的操作方法及注意事項是什么

2019-11-15

一.立柱安裝

操作要點:裝填前在塔底墊一層吸附棉,防止吸附劑泄漏。

有兩種方法加載柱干法和濕法。

(1)干柱裝填:硅膠通過漏斗裝入柱內,中間不間斷,形成滴流,緩慢加入管內。青島層析硅膠廠家也可以用橡皮槌敲擊柱子,使硅膠填充連續、均勻、致密。柱安裝完畢后,打開下端活塞,注入洗脫液洗脫,排出柱內空氣,保持一定的液位。

(2)柱濕載:將待用洗脫液裝入柱內,打開下端活塞,使洗脫液緩慢流出。然后將硅膠緩慢、連續地倒入柱中(或將硅膠與適量洗脫液混合,形成懸浮液,緩慢地加入柱中)。硅膠在重力和洗脫液的作用下可以在柱中自由沉降。在此期間,流出的洗脫液應繼續加入柱內,保持一定的液位,直到硅膠完全加入,柱內沉降不再發生變化。然后在硅膠上加一小塊濾紙或一點吸水棉。根據樣品量,將洗脫液的液位控制在一定的高度。

均質:攪拌成勻漿。加入兩倍于干硅膠體積的溶劑,用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫液為石油醚/乙酸乙酯/丙酮體系,則與石油醚混合;如果洗脫液為氯仿/乙醇體系,則與氯仿混合。如果不能攪拌成勻漿,說明溶劑中的水含量過高,特別是乙酸乙酯/丙酮。如果與水不相容要去除分配色譜,必須事先用無水硫酸鈉長期干燥。氯仿用無水氯化鈣干燥以除去1%的酒精。如果樣品對酸敏感,則不能使用氯仿系統通過色譜柱。

柱層析硅膠的操作方法及注意事項是什么

2.裝載樣品

將待分離樣品溶于柱載時使用的少量洗脫液中,制備體積小、濃度高的樣品溶液,并將樣品溶液加入色譜柱硅膠表面。如果樣品未溶解在柱載用的洗脫液中,則將樣品溶解在揮發性溶劑中,加入適量硅膠(不超過柱中硅膠總量的1/10)并與之充分混合,除去溶劑,將與樣品混合的硅膠均勻地添加到柱的頂部(始終保持一定液位的洗脫液),然后覆蓋一層硅膠。

裝樣時注意沿柱內壁緩慢加入,始終保持硅膠上端面平整。進樣量為硅膠的1/60~1/30。

柱層析硅膠的操作方法及注意事項是什么

三.洗脫

洗脫劑可通過薄層色譜法進行選擇。薄層色譜時,Rf值為0.2~0.3的溶劑體系一般采用梯度洗脫。

首先,打開柱下端活塞,保持洗脫液流速為每秒1~2滴。在上端連續加入洗脫劑(加入速度可由分液漏斗控制,與下端流出速度相似)。如果單一溶劑的洗脫效果不好,可以用混合溶劑進行洗滌(一般不超過三種溶劑),通常采用梯度洗脫。洗脫液的洗脫能力由弱變強。

四.收集和處理

洗脫液以相等的比例收集,每個部分的量大約等于使用的硅膠的量。用薄層法對每種洗脫液進行定性檢測,并將含有相同組分的洗脫液進行組合。經過濃縮和再結晶,通??梢缘玫絾误w組分。如果仍然是幾個單體組分的混合物,則單體組分的結晶不易分離出來。需要進一步的色譜分析或通過其他方法進行分離。

注:(1)柱層析比薄層色譜具有更強的分離能力和更好的分離效果,特別是對于結構相似、性質相似、薄層色譜分離困難的組分。

(2)洗滌塔時,不要使用含水的混合溶劑。


標簽

Z近瀏覽:

青島碩遠硅膠科技有限公司

業務經理:15265203977   QQ:3064385339

業務一部  座機:0532-87810877

手機: 15192622177        QQ:2101077641

業務二部  座機:0532-87810977

手機: 15192683977        QQ:1252403083

售后電話:15192685877    技術電話:18366268899

服務監督電話:15192661599   座機:0532-87819577

傳真:0532-87810277      郵箱: shuoyuanchina@163.com      

網址:www.cubeworksinc.com

阿里網址一:shuoyuanchina.1688.com

阿里網址二:chinashuoyuan.1688.com

公司地址:山東省青島市城陽區上馬街道岙東中路438號

關注我們

業務一部業務二部