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薄層層析硅膠廠家講解技層析硅膠在中草藥化學成分分析中的應用

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薄層層析硅膠廠家講解技層析硅膠在中草藥化學成分分析中的應用

2020-01-09

層析法的基本原理:

層析硅膠過程是基于樣品組分在互不相溶的兩“相”溶劑之間的分配系數之差(分配層析),組分對吸附劑吸附能力不同(吸附層析),和寓子交換,分子的大?。ㄅ抛鑼游觯┒蛛x。通常又將一般的以流動相為氣體的稱為氣相層析,流動相為液體的稱為液相層析。

   (一)吸附層析法(AdsorptionChromatography)

   吸附劑、溶劑與被分離物性質的關系:液一固吸附層析是運用較多的一種方法,特別適用于很多中等分子量的樣品(分子量小于1,000的低揮發性樣品)的分離,尤其是脂溶性成分一一般不適用于高分子量樣品如蛋白質、多糖或離子型親水住化合物等的分離。吸附層析的分離效果,決定于吸附劑、溶劑和被分離化合物的性質這三個因素。    

1. 吸附劑:常用的吸附劑有硅膠、氧化鋁、活性炭、硅酸鎂、聚酰胺、硅藻土等。

(1) 硅膠:層析用硅膠為一多孔性物質,分子中具有硅氧烷的交鏈結構,同時在顆粒表面又有很多硅醇基。硅膠吸附作用的強弱與硅醇基的含量多少有關。硅醇基能夠通過氫鍵的形成而吸附水分,因此硅膠的吸附力隨吸著的水分增加而降低。若吸水量超過17%,吸附力極弱不能用作為吸附劑,但可作為分配層析中的支持劑。對硅膠的活化,當硅膠加熱至100~110℃時,硅膠表面因氫鍵所吸附的水分即能被除去。當溫度升高至500℃時,硅膠表面的硅醇基也能脫水縮臺轉變為硅氧烷鍵,從而喪失了因氫鍵吸附水分的活往,就不再有吸附劑的性質,雖用水處理亦不能恢復其吸附活性。所以硅膠的活化不宜在較高溫度進行(一般在170cC以上即有少量結合水失去)。

   硅膠是一種酸性吸附劑,適用于中性或酸性成分的層析。同時硅膠又是一種弱酸性陽離子交換劑,其表面上的硅醇基能釋放弱酸性的氫離子,當遇到較強的堿注化臺物,則可因離子交換反應而吸附堿性化合物。

層析技術在中草藥化學成分分析中的應用

   (2)氧化鋁:氧化鋁可能帶有堿性(因其中可混有碳酸鈉等成分),對于分離一些堿性中草藥成分,如生物堿類的分離頗為理想。但是堿性氧化鋁不宜用于醛、酮、醋、內酯等類型的化合物分離。因為有時堿性氧化鋁可與上述成分發生次級反應,如異構化、氧化、消除反應等。除去氧化鋁中絢堿性雜質可用水洗至中性,稱為中性氧化鋁。中性氧化鋁仍屬于堿性吸附劑的范疇,本適用于酸性成分的分離。用稀硝酸或稀鹽酸處理氧化鋁,不僅可中和氧化鋁中含有的堿性雜質,并可使氧化鋁顆粒表面帶有NO3一或CI一的陰離子,從而具有離于交換劑的性質,適合于酸性成分的層析,這種氧化鋁稱為酸性氧化鋁。供層析用的氧化鋁,用于拄層析的,其粒度要求在100~160目之間。粒度大子100目,分離效果差:小于160目,溶濃流速大慢,易使譜帶擴散。樣品與氧化鋁的用量比,一般在1:20~50之間層析柱的內徑與柱長比例在1:10-20之向。

   在用溶劑沖洗柱時,流速不宜過快,洗脫液的流速一般以每半~1小時內流出液體的毫升數與所用吸附劑的重量(克)相等為合適。

層析技術在中草藥化學成分分析中的應用

   (3)活性炭:是使用較多的一種非極性吸附劑。一般需要先用稀鹽酸洗滌,其次用乙醇洗,再以水洗凈,于80℃干燥后即可供層析用。層析用的活性炭,選用顆?;钭⑻?,若為活性炭細粉,則需加入適量硅藻土作為助濾劑一并裝柱,以免流速太慢?;钚蕴恐饕矣诜蛛x水溶性成分,如氨基酸、糖類及某些甙?;钚蕴康挠袨槲阶饔?,在水溶液中強,在有機溶劑中則較低弱。故水的洗脫能力弱,而有機溶劑則較強。例如以醇-水進行洗脫時,則隨乙醇濃度的遞增而洗脫力增加?;钚蕴繉Ψ枷阕寤衔锏奈搅Υ笥谥咀寤衔?,對大分子化合物的吸附力大于小分子化合物。薄層層析硅膠廠家利用這些吸附性的差別,可將水溶性芳香族物質與脂肪族物質分開,單糖與多糖分開,氨基酸與多肽分開。


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