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柱層析硅膠實際應用綜述

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柱層析硅膠實際應用綜述

2020-09-21

 色譜法,又稱層析法.是一種以分配平衡為機理的分配方法,色譜體系包含兩個相,一個是固定相,一個是流動相。當兩相相對運動時,反復多次的利用混合物中所含各組分分配平衡性質的差異,達到彼此分離的目的。它是純化和分離有機或無機物的一種方法。

色譜法按固定相的狀態可分為柱色譜、平板色譜和棒色譜三種,而實驗室和實際中常用的是柱層析硅膠和薄層硅膠板,以及它們之間的配合應用。

層析硅膠

吸附色譜原理

在一定條件下硅膠與被分離物質之間產生作用,這種作用主要是物理和化學作用,兩種物理作用來自于硅膠表表面與溶質分子之間的范德華力,化學作用主要是硅膠表面的硅羥基與待分離物質之間的氫鍵作用。

柱層析硅膠實際應用綜述

柱層析硅膠的實際應用

以實驗室為例具體的操作步驟如下:

硅膠的準備

準備一定數量的柱層析硅膠,如200-300目的規格。

實驗儀器準備

一支玻璃色譜柱柱,一個鐵架臺,燒杯,錐形瓶,徑口直徑較大的玻璃漏斗,一支玻璃棒。

裝柱

柱層析硅膠的加入

方法有干法和濕法兩種,下面具體介紹操作方法。

①干法:將硅膠一次加入色譜柱,振動管壁使其均勻下沉,然后沿管壁緩緩加入開始層析時使用的流動相,或將色譜柱下端出口加活塞,加入適量的流動相,旋開活塞使流動相緩緩滴出,然后自管頂緩緩加入硅膠,使其均勻地潤濕下沉,在管內形成松緊適度的吸附層。操作過程中應保持有充分的流動相留在硅膠的上面。

②濕法:將硅膠與流動相混合,攪拌以除去空氣泡,徐徐傾入色譜柱中,然后再加入流動相,將附著于管壁的吸附劑洗下,使色譜柱表面平整。填裝硅膠所用流動相從色譜柱自然流下,液面將柱表面相平時,即加試樣溶液.

柱層析硅膠實際應用綜述

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