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柱層析硅膠廠家帶您淺析其產品運用技巧有哪些

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柱層析硅膠廠家帶您淺析其產品運用技巧有哪些

2021-03-15

柱層析硅膠廠家小編帶您了解其相關知識:硅膠層析法的別離原理是依據物質在硅膠上的吸附力不同而得到別離,一般情況下較大的物質易被硅膠吸附,較弱的物質不易被硅膠吸附,整個層析進程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸進程。依據填充基質和樣品分配交流原理不同,離子交流層析,凝膠過濾層析和親和層析是三種別離混合物的經典層析技能。

    在運用層析硅膠時的幾個技巧:  

    1、硅膠的運用

    初做柱層析很容易把柱子裝得長了或短了,有時還會有很多的硅膠剩余,糟蹋硅膠,這主要是對硅膠等固定相的運用的量沒有掌握。柱層析用的硅膠一般是100-200目,100毫升硅膠的質量在47克左右,假如裝一個直徑是2.8厘米的柱子,能夠裝18厘米高。

柱層析硅膠

    2、洗脫劑的運用

    洗脫劑的可用薄層層析來確定,一般以待別離樣品Rf值為0.2-0.3為宜。選擇的洗脫劑應該使兩相鄰物質Rf值之差大化。不要認為在板上爬得高別離的效果就比較好,假如Rf在0.6,即使相差0.2也不容易在柱子上分開,柱層析硅膠廠家認為因為柱子是一個屢次爬板的進程,能夠通過公式的比較:0.6/0.8一次的別離度,肯定不如(0.2/0.3)的三次方或四次方大。

    常用的展開劑性小的用乙酸乙酯:石油醚體系;性較大的用甲醇:氯仿體系;性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸體系;拖尾能夠加入少量氨水或冰醋酸。對于很難別離的化合物,一是增加柱子的長度和直徑,二是減小洗脫劑的性,這樣能夠很好地將混合物分開。

    3、柱層析硅膠裝柱子的技巧

    柱層析的裝柱非常重要,裝柱的效果會直接影響層析別離效果。有濕法裝柱和干法裝柱等兩種辦法。濕法裝柱很簡單,運用也普遍,就是先用比固定相多一倍的洗脫劑將固定相活成勻漿,柱子底部先用脫脂棉塞緊,然后倒入洗脫劑將脫脂棉中氣泡趕出。

    處理的辦法是:(1)固定相一定要增加健壯;(2)一定要用較多的溶劑“走柱子”。


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