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柱層析硅膠的操作方法

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柱層析硅膠的操作方法

2022-03-12

1.柱層析硅膠一般操作方法

1.1.稱重。200-300目硅膠材料,稱30-70倍于上樣量;假如不易分,還可以用100倍量的硅膠材料H。干硅膠的視密度在0.4上下,因此要稱40g硅膠材料,用量杯量100ml還可以。

1.2.攪拌成勻漿。添加干硅膠材料容積一倍的有機溶劑用玻璃棒充足拌和。假如沖洗掉劑是乙醚/乙酸丁酯/甲苯管理體系,就用乙醚拌;假如沖洗掉劑是乙醚/醇管理體系,就用乙醚拌。假如不可以攪拌成勻漿,表明有機溶劑中水分含量很大,尤其是乙酸丁酯/甲苯,假如不與水搭配走分派色譜儀得話,務必事先用無水硫酸鈉久置干躁。乙醚用無水氯化鈣干躁,以去除1%的醇。假如試品對酸比較敏感,不能用乙醚管理體系過柱。

1.3.裝柱。將柱底用棉絮塞緊,無須用海沙,添加約1/3容積乙醚(氯仿),裝上蓄液球,開啟柱下活塞桿,將勻漿一次落于蓄液球內。伴隨著地基沉降,會出現一些硅膠材料沾在蓄液球內,用乙醚(氯仿)將其沖入柱中。

1.4.夯實。地基沉降進行后,添加大量的乙醚,用雙連球或打氣泵充壓,直到流動速度穩定。柱床約被縮小至9/10容積。無論自然壓柱或充壓柱,都應開展這一步,可使分離度提升許多,且可以防止過柱時因為柱床衰老造成裂開。

1.5.上樣。干式干法都能夠。海沙是沒必要的。上樣后,添加一些沖洗掉劑,再將一團脫脂棉塞至貼近硅膠材料表層。隨后就可以安心地添加很多沖洗掉劑,而不容易損壞硅膠材料表層。

1.6.過柱和搜集。柱層析事實上是在蔓延和分離出來中間的衡量。太低的沖洗掉抗壓強度并不太好,強烈推薦用梯度洗脫。搜集的事例:10mg上樣量,1g硅膠材料H,0.5ml收一減壓渣油;1-2g上樣量,50g硅膠材料(200-300目),20-50ml收一減壓渣油。

1.7.檢驗。要大量地應用專用型噴顯劑,假如僅用紫外線殺菌燈,會損害較多商品,紫外光的敏感度一般比噴顯劑低1-2個量級。

1.8.送譜。搜集的商品旋干,在送譜前通常需要重結晶。假如試品太少或者是為液態,可過一小疑膠柱,做為送譜前的提純方式??扇コ龤渥V1.5ppm上下所說的“硅膠”峰。

柱層析硅膠

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